welcome快盈

您當前的位置 : 首 頁 > 資訊動態 > 常見問題

什么是聚丙烯酰胺凝膠電泳

2021-03-18 11:45:10

聚丙烯酰胺凝膠電泳

聚丙烯酰胺凝膠電泳(英語:polyacrylamidegelelectrophoresis,簡稱PAGE)是以聚丙烯酰胺凝膠為支撐介質的常用電泳技術,用于分離蛋白質和寡核苷酸。

工作原理:聚丙烯酰胺凝膠為網狀結構,起到分子篩作用。電泳中,非變性聚丙烯酰胺凝膠(Native-PAGE)和 SDS- PAGE (SDS-PAGE)兩種形式;

電泳中,蛋白質可以保持完整狀態,并根據其分子大小、形狀和附帶的電荷量,逐漸分離。

PAGE可單獨分離蛋白質,只取決于蛋白質的亞基分子量。這項技術是1967年由 shapiro發明的,他發現在樣品介質和丙烯酰胺凝膠中加入離子去污劑和強還原劑(SDS,即十二烷基硫酸鈉)后,蛋白質亞基的電泳移移移率主要取決于亞基分子量(可以忽略電荷因素)。

負離子去污劑 SDS作為變性劑和助溶劑,可以打破分子內和分子間的氫鍵,使分子去折疊,破壞蛋白質分子的二元和三元結構。二硫蘇糖醇是一種強還原劑,它能破壞半胱氨酸殘基間的二硫鍵。

將還原劑和 SDS加入到樣品和凝膠中,將分子解聚成多肽鏈,將解聚后的氨基酸側鏈和 SDS膠束結合成蛋白- SDS膠束,使其帶負電荷量大大超過蛋白質本身,從而消除不同分子間的電荷差異和結構差異。


最近瀏覽:

技術支持: